Université Pierre et Marie Curie

Génétique

Introduction
Génes et génomes
Préparation de l’ADN à cloner
Les vecteurs
Ligation
Banque d’ADN génomique
Définition
Amplification
Complétude
Utilisation des fragments clonés
Les gènes
L’analyse des génomes
Recherche de gènes
Polymorphisme
Mutagenèse
Analyse fonctionnelle
Cartographie
Biodiversite, évolution
Applications
Glossaire
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Amplification

 

On peut utiliser la banque telle quelle (voir le chapitre suivant) pour déterminer la séquence de certains clones ou pour rechercher un gène particulier. Dans ce cas elle ne va servir qu'une fois car son volume est limité. On peut choisir de l'amplifier. Dans ce cas on va reprendre en aveugle une partie de la banque (chaque clone contient de 103 à 104 cellules si bien que la probabilité qu'une fraction de celle-ci contienne encore un exemplaire de chaque clone n'est pas déraisonnable) . Cet échantillon va à nouveau se multiplier, chaque cellule va donner à nouveau un clone. Le risque est que toutes ces cellules différentes car portant un vecteur différent soient plus ou moins altérées par sa présence. Leur temps de génération peut fluctuer légèrement. Sur 103 à 104 génération l'écart devient notable si bien que les cellules qui se divisent le plus vite vont devenir majoritaires (et le vecteur qu'elles contiennent) alors que celles qui se divisent le plus lentement vont se raréfier et finir par disparaître. Il est donc préférable de ne pas faire de nombreuses amplifications XE "amplifications" successives.

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