Mise en ordre
Une fois les différents
fragments séquencés il reste à les remettre dans l'ordre
naturel. Ces fragments proviennent d'une digestion partielle
(donc de coupures au hasard) et il y en a qui se chevauchent.
Il faut donc repérer des séquences qui sont uniques dans
le génome et que l'on retrouve sur deux fragments. En superposant
la séquence unique, les deux fragments seront positionnés
l'un par rapport à l'autre et la portion de génome reconstituée
aura grandi. On continue de proche en proche jusqu'à la
reconstitution du chromosome entier.
L'analyse de nombreux clones
ne peut évidemment être faite à la main. Il existe des logiciels
puissants dans lesquels la recherche des fragments chevauchants
est automatisée.
Figure 2-36. Une carte d'éléments
contigus (un " contig ")est construite en utilisant
le nombre minimum de fragments chevauchant qui contiennent
des portions identiques. Une carte à basse résolution peut
être faite en utilisant comme repères des sites de coupure
d'enzymes de restriction qui coupent rarement. C'est finalement
le séquençage qui confirme les chevauchements.