La biologie moléculaire offre maintenant des méthodes différentes de provoquer des mutations dans des gènes particuliers.

Le séquençage systématique du génome entier d'un organisme et les annotations ont permis de découvrir des gènes putatifs pour lesquels on n'a pas de mutants mais dans certains cas on n'a aucune idée de la fonction assurée par la nouvelle ORF (même par comparaison). Le programme d'étude du génome peut alors se prolonger par la mutation in vitro de ce gène , sa réintroduction dans l'organisme vivant à la place du gène fonctionnel et l'observation des modifications phénotypiques que cela entraîne (ou pas ) pour cet organisme